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PCR組實習生出組考試題
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1. PCR反應(yīng)的基本步驟不包括以下哪一項（）
A. 變性
B. 退火
C. 延伸
D. 裂解
2. 以下哪種物質(zhì)不是PCR反應(yīng)所必需的（）
A. 引物
B. dNTP
C. Taq DNA聚合酶
D. 瓊脂糖
3. PCR反應(yīng)中，引物的作用是（）
A. 提供模板
B. 提供3'-OH末端，引導DNA合成
C. 激活Taq酶
D. 增加反應(yīng)體系的穩(wěn)定性
4. Taq DNA聚合酶的最適反應(yīng)溫度約為（）
A. 55℃
B. 72℃
C. 94℃
D. 37℃
5. PCR反應(yīng)中變性溫度一般設(shè)置為（）
A. 55 - 65℃
B. 72℃
C. 94 - 98℃
D. 37℃
6. 退火溫度通常取決于（）
A. 引物的長度和堿基組成
B. 模板的長度
C. Taq酶的活性
D. dNTP的濃度
7. 以下關(guān)于dNTP的描述，錯誤的是（）
A. 包括dATP、dTTP、dCTP、dGTP
B. 是PCR反應(yīng)的原料
C. 濃度過高會增加堿基錯配的幾率
D. 可以用NTP代替
8. 反轉(zhuǎn)錄PCR（RT - PCR）的模板是（）
A. DNA
B. mRNA
C. tRNA
D. rRNA
9. 實時熒光定量PCR（qPCR）中，用于監(jiān)測PCR產(chǎn)物擴增的熒光信號通常來自（）
A. 熒光染料或熒光標記的探針
B. 引物自身的熒光
C. Taq酶的熒光
D. 模板DNA的熒光
10. 在qPCR中，Ct值的含義是（）
A. 達到熒光閾值所需的循環(huán)數(shù)
B. 熒光信號的強度
C. 反應(yīng)體系的溫度
D. 引物的濃度
11. 在PCR實驗中，配制反應(yīng)體系時，最后加入的成分通常是（）
A. 引物
B. dNTP
C. Taq酶
D. 模板DNA
12. 進行PCR實驗時，移液器使用的正確操作順序是（）
①調(diào)準量程 ②安裝吸頭 ③吸取液體 ④排出液體 ⑤卸去吸頭
A. ①②③④⑤
B. ②①③④⑤
C. ①③②④⑤
D. ②③①④⑤
13. PCR實驗中，為防止交叉污染，以下操作錯誤的是（）
A. 不同樣本使用同一套移液器吸頭
B. 實驗前后對操作臺面進行消毒
C. 戴手套操作
D. 分區(qū)操作，如設(shè)置試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR擴增區(qū)等
14. 當PCR反應(yīng)結(jié)束后，進行瓊脂糖凝膠電泳檢測時，上樣緩沖液的作用不包括（）
A. 增加樣品密度，使樣品沉入加樣孔
B. 含有指示劑，指示電泳的進程
C. 提供電荷，使樣品在電場中移動
D. 保護DNA樣品
15. 瓊脂糖凝膠電泳時，DNA樣品在電場中向（）極移動
A. 正
B. 負
C. 不一定，取決于DNA的性質(zhì)
D. 以上都不對
16. 配制瓊脂糖凝膠時，以下操作正確的是（）
A. 直接將瓊脂糖加入電泳緩沖液中加熱溶解
B. 瓊脂糖溶解后可立即倒入制膠板中制膠
C. 制膠時不需要插入梳子
D. 凝膠凝固后可長時間放置在室溫下
17. 在qPCR實驗中，進行標準曲線制作時，標準品的稀釋通常采用（）
A. 連續(xù)梯度稀釋法
B. 隨機稀釋法
C. 等體積稀釋法
D. 以上都不對
18. 進行PCR實驗時，若發(fā)現(xiàn)產(chǎn)物條帶模糊，可能的原因不包括（）
A. 引物特異性差
B. 退火溫度過低
C. Taq酶濃度過低
D. 模板DNA濃度過高
19. 若PCR產(chǎn)物電泳后沒有條帶，可能的原因是（）
A. 引物設(shè)計不合理
B. dNTP濃度過高
C. 延伸時間過長
D. 電泳電壓過高
20. 在PCR實驗中，使用的離心管、吸頭等耗材通常需要進行（）處理，以防止RNase或DNase污染
A. 高溫滅菌
B. 紫外線照射
C. 用DEPC水浸泡
D. 以上都是
21. 對PCR產(chǎn)物進行測序分析時，測序結(jié)果與預期序列存在差異，可能的原因是（）
A. PCR擴增過程中的堿基錯配
B. 測序技術(shù)本身的誤差
C. 模板DNA存在突變
D. 以上都是
22. 在qPCR實驗中，若實驗組和對照組的Ct值相差不大，可能的原因是（）
A. 目的基因在兩組中的表達水平相近
B. 實驗操作存在誤差
C. 引物或探針的特異性不好
D. 以上都是
23. PCR技術(shù)在疾病診斷中的應(yīng)用不包括（）
A. 病原體的檢測
B. 基因突變的檢測
C. 腫瘤標志物的檢測
D. 血型的鑒定
24. 在分子克隆中，PCR技術(shù)可用于（）
A. 擴增目的基因
B. 構(gòu)建重組載體
C. 篩選陽性克隆
D. 以上都是
25. 以下關(guān)于熒光定量PCR結(jié)果分析的描述，正確的是（）
A. Ct值越小，表明樣本中目的基因的起始拷貝數(shù)越多
B. Ct值越大，表明樣本中目的基因的起始拷貝數(shù)越多
C. 熒光信號強度與目的基因的拷貝數(shù)無關(guān)
D. 不需要設(shè)置內(nèi)參基因進行結(jié)果校正
26. 若PCR產(chǎn)物的電泳條帶比預期的條帶大，可能的原因是（）
A. 引物二聚體形成
B. 非特異性擴增
C. 模板DNA降解
D. 退火溫度過高
27. 在利用PCR技術(shù)進行遺傳多樣性分析時，常用的分子標記是（）
A. RAPD
B. SSR
C. AFLP
D. 以上都是
28. PCR技術(shù)在法醫(yī)學中的應(yīng)用主要是（）
A. 個體識別
B. 親子鑒定
C. 犯罪現(xiàn)場物證分析
D. 以上都是
29. 對qPCR實驗結(jié)果進行統(tǒng)計學分析時，常用的方法是（）
A. t檢驗
B. 方差分析
C. 相關(guān)性分析
D. 以上都可能用到
30. 當PCR產(chǎn)物的電泳結(jié)果顯示有引物二聚體條帶時，可采取的措施是（）
A. 提高退火溫度
B. 降低引物濃度
C. 優(yōu)化引物設(shè)計
D. 以上都是
31. PCR實驗室的生物安全防護措施不包括（）
A. 穿實驗服
B. 戴口罩和手套
C. 隨意丟棄使用過的耗材
D. 對實驗廢棄物進行妥善處理
32. 在PCR實驗中，為保證實驗結(jié)果的準確性和可靠性，需要進行質(zhì)量控制，以下不屬于質(zhì)量控制措施的是（）
A. 設(shè)置陽性對照和陰性對照
B. 定期校準移液器
C. 隨意更改實驗參數(shù)
D. 對實驗試劑進行質(zhì)量檢測
33. PCR實驗室的環(huán)境要求包括（）
A. 保持清潔衛(wèi)生
B. 控制溫度和濕度
C. 避免強光直射
D. 以上都是
34. 實驗過程中，若不慎將PCR試劑濺到皮膚上，應(yīng)立即（）
A. 用大量清水沖洗
B. 用酒精擦拭
C. 用消毒劑消毒
D. 無需處理
35. 對PCR實驗中使用的儀器設(shè)備，如PCR儀、離心機等，應(yīng)（）
A. 定期維護和校準
B. 隨意操作，無需培訓
C. 長時間連續(xù)使用，不進行休息
D. 出現(xiàn)故障后再進行維修
36. 在PCR實驗中，質(zhì)量控制的關(guān)鍵環(huán)節(jié)不包括（）
A. 樣本采集和處理
B. 反應(yīng)體系的配制
C. 實驗操作人員的著裝
D. 結(jié)果分析和報告
37. 為防止PCR實驗室的氣溶膠污染，可采取的措施有（）
A. 使用帶濾芯的吸頭
B. 定期對實驗室進行空氣消毒
C. 合理分區(qū)，減少人員流動
D. 以上都是
38. 若PCR實驗的陽性對照無擴增產(chǎn)物，可能的原因是（）
A. 陽性對照模板失效
B. 反應(yīng)體系存在問題
C. 儀器設(shè)備故障
D. 以上都是
39. PCR實驗中，質(zhì)量控制記錄應(yīng)包括（）
A. 實驗日期、操作人員
B. 實驗試劑和儀器設(shè)備信息
C. 實驗結(jié)果和質(zhì)量控制情況
D. 以上都是
40. 對PCR實驗室的質(zhì)量控制進行評估時，可采用的方法有（）
A. 室間質(zhì)量評價
B. 室內(nèi)質(zhì)量控制圖分析
C. 人員比對和方法比對
D. 以上都是
41. 數(shù)字PCR（dPCR）與傳統(tǒng)qPCR相比，其優(yōu)勢在于（）
A. 無需標準曲線即可進行絕對定量
B. 靈敏度更高
C. 對樣本起始量要求更低
D. 以上都是
42. 微滴式數(shù)字PCR（ddPCR）是將PCR反應(yīng)體系分割成大量微小的液滴，每個液滴相當于一個獨立的（）
A. PCR反應(yīng)管
B. 細胞
C. 引物
D. 模板
43. 多重PCR是指在一個反應(yīng)體系中同時擴增（）個靶基因
A. 1
B. 2個或2個以上
C. 不確定
D. 以上都不對
44. 巢式PCR的優(yōu)點是（）
A. 提高擴增的特異性
B. 增加擴增的靈敏度
C. 減少非特異性擴增
D. 以上都是
45. 實時熒光定量PCR技術(shù)在新型冠狀病毒檢測中的應(yīng)用，主要是檢測病毒的（）
A. 蛋白質(zhì)
B. 核酸
C. 多糖
D. 脂質(zhì)
46. 隨著技術(shù)的發(fā)展，PCR技術(shù)在以下哪個領(lǐng)域的應(yīng)用越來越廣泛（）
A. 精準醫(yī)學
B. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)
C. 環(huán)境監(jiān)測
D. 以上都是
47. 以下關(guān)于單分子PCR的描述，正確的是（）
A. 可以對單個DNA分子進行擴增和分析
B. 不需要引物
C. 反應(yīng)體系與傳統(tǒng)PCR完全相同
D. 對儀器設(shè)備要求不高
48. 高分辨率熔解曲線分析（HRM）與PCR技術(shù)結(jié)合，可用于（）
A. 基因突變的檢測
B. 基因分型
C. 病原體的鑒定
D. 以上都是
49. 等溫擴增技術(shù)是一類不依賴熱循環(huán)的核酸擴增技術(shù)，與傳統(tǒng)PCR相比，其優(yōu)點是（）
A. 無需PCR儀，設(shè)備簡單
B. 反應(yīng)速度快
C. 對樣本質(zhì)量要求低
D. 以上都是
50. PCR技術(shù)未來的發(fā)展趨勢包括（）
A. 更高的靈敏度和特異性
B. 與其他技術(shù)的融合
C. 實現(xiàn)自動化和便攜化
D. 以上都是
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